2019年12月開(kāi)始，在我國(guó)暴發(fā)了一種新的以肺炎為特征的呼吸系統(tǒng)疾病。2020年1月12日經(jīng)分離鑒定，確認(rèn)為一種新型冠狀病毒，并被 WHO命名為 2019-nCoV。隨后，由該新型冠狀病毒引起的肺炎，迅速傳播至全國(guó)30多個(gè)省市，并向亞洲、澳洲、歐洲、美洲傳播，截至本文發(fā)稿，仍在迅速發(fā)展中。

為了盡快控制疫情的發(fā)展，阻斷疫病的傳播，恢復(fù)正常的生產(chǎn)與生活，我們查閱了近年來(lái)國(guó)內(nèi)外冠 狀病毒有關(guān)的科研論文，就冠狀病毒在各種環(huán)境中的抵抗力與消毒技術(shù)做一介紹，希望為相關(guān)部門制定正確的消毒指南與防控措施提供依據(jù)。

01冠狀病毒的生物學(xué)

冠狀病毒，是自然界廣泛存在的一大類病毒，是人畜共患病毒的一大家族，可以感染人、鼠、豬、貓、犬、蝙蝠與禽類脊椎動(dòng)物。到目前為止，大約有 17 種不同冠狀病毒株被發(fā)現(xiàn)，其中有6種感染人。國(guó)際病毒學(xué)分類委員會(huì)將冠狀病毒科分為4個(gè)屬即 α、β、γ和 δ屬。這意味著它們很容易從動(dòng)物傳播 給人類，范圍從流感樣疾病到致命的呼吸道疾病。

冠狀病毒是單股正鏈 RNA病毒，直徑約60~ 220nm。有包膜 ，包膜上存在棘突 ，整個(gè)病毒像日冕 ，不同的冠狀病毒的棘突有明顯的差異 。包膜表面有3種糖蛋白 :刺突蛋白 (Spike Protein，S蛋白 ，是受體結(jié)合位點(diǎn) 、溶細(xì)胞作 用和主要抗原位點(diǎn) );包膜蛋白(EnvelopeProtein，E蛋白，較小，與包膜結(jié)合 的蛋白 );膜蛋白 (MembraneProtein，M蛋白 ，負(fù)責(zé)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸、新生病毒出芽釋放與病毒外包膜的形成)。

以前流行的人冠狀病毒，主要是 29E株、OC43株、NL63株和 HKU1株。最近幾年，發(fā)現(xiàn)了致病性更高的人冠狀病毒的新成員 ，即 2002 – 2003 年的嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合癥冠狀病毒(SARS-CoV)、2012年的中東呼吸系統(tǒng)綜合癥冠 狀病毒 (MERS-CoV)。故此，2019年的新型冠狀病毒(2019-nCoV)，被稱為第 7 種人冠狀病毒 ，它 屬于β冠狀病毒屬 、Sarbe 亞屬。2019新型冠狀病毒與 2份來(lái)自蝙蝠體內(nèi)的SARS樣冠狀病毒株組成 Sarbe亞屬B譜系中的一個(gè)新分支;來(lái)自人體的 SARS冠狀病毒則與中國(guó)西南部蝙蝠體內(nèi)分離到SARS樣冠狀病毒組成 Sarbe亞屬 B譜系中的另外一個(gè)分支。可見(jiàn)，2019新型冠狀病毒是SARS冠狀病毒的近親〔1，2〕。

人冠狀病毒(HCoV)于 1965年首次被報(bào)道，它還是所有年齡段普通感冒的病原之一，與夏季和秋季相比 ，冬季和春季感染的發(fā)生率更高〔3〕。人冠狀病毒感染在全世界非常普遍，人群中普遍存在冠狀病毒抗體，成年人高于兒童。各國(guó)報(bào)道的人群抗體陽(yáng)性率不同，我國(guó)人群以往冠狀病毒抗體陽(yáng)性率在30% ~60%。

臨床上，多數(shù)冠狀病毒引起輕度和自愈性疾病，但少數(shù)可有嚴(yán)重的肺炎 、神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥 。人冠狀病毒通過(guò)呼吸道分泌物排出體外 ，經(jīng)口液 、噴嚏 、接觸傳染，并通過(guò)空氣飛沫傳播，感染高峰在秋冬和早春〔4〕。

02冠狀病毒的抵抗力

冠狀病毒作為呼吸道傳播的主要病原體，在自然界中各個(gè)儲(chǔ)存宿主之間相互傳播，對(duì)各種自然環(huán)境因素都具有較高的抵抗力。其抵抗力主要受到溫度、濕度的影響。

以前發(fā)現(xiàn)的4種人冠狀病毒，由于引起的呼吸道癥狀輕，類似普通感冒。人冠狀病毒(HCoV)引起普通感冒的三分之一，并且早產(chǎn)兒中已有醫(yī)院獲得的上呼吸道HCoV感染的報(bào)道。為了評(píng)估可能的感染源，有人研究了病毒懸浮液在水懸浮液以及代表醫(yī)院環(huán)境的吸收性和非吸收性表面上的存活率。病毒可以在鹽溶液中存活長(zhǎng)達(dá)6d，而在有或沒(méi)有添加細(xì)胞的培養(yǎng)基中存活的時(shí)間要短。干燥3h后在各種表面(鋁，無(wú)菌乳膠外科手術(shù)手套，無(wú)菌海綿)上仍可檢測(cè)到 HCoV-29E的感染性〔6〕。

近年來(lái)，因?yàn)椴《咀儺愐鸬闹匕Y呼吸系統(tǒng)疾病的冠狀病毒陸續(xù)出現(xiàn)，其抵抗力的研究才引起重視 。學(xué)術(shù)界認(rèn)為 ，SARS-CoV感染的主要傳播途徑是呼吸道飛沫。但是也可以檢測(cè)到該病毒在其他體液和排泄物中 。因此 ，在不同的排泄物中 ，SARS-CoV的抵抗力也不一樣。2003年，我國(guó)學(xué)者首先評(píng)估了SARS-CoV在外界環(huán)境物品中生存的能力。將實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的高滴度的 SARS-CoV的BJ-01株，人工污染在滅菌后的塑料片、玻璃片、棉布片、濾紙片、不銹鋼片和木片的表面，或混合在滅菌土壤和自來(lái)水樣品中，室溫下存放不同時(shí)間后，用細(xì)胞培養(yǎng)法檢測(cè) SARS-CoV。結(jié)果，SARS-CoV在模擬污染的玻璃片、不銹鋼片、塑料片上可以存活至少2d，在模擬污染的濾紙片、木片、棉布片、土壤上至少可存活4~6h，在污染的自來(lái)水中2d仍然保持較強(qiáng)的感染性。該研究提示 SARS-CoV在外界環(huán)境物品中具有較強(qiáng)的生存能力。干燥可以促進(jìn) SARS-CoV死亡〔7〕。

WHO利用其成員實(shí)驗(yàn)室:中國(guó)香港特別行政區(qū)政府病毒實(shí)驗(yàn)室、香港大學(xué)瑪麗醫(yī)院、日本國(guó)家傳染病研究所、德國(guó) Marburg大學(xué)實(shí)驗(yàn)室，同樣共同驗(yàn)證了 SARS-CoV的抵抗力 。結(jié)果 ，在塑料表面的SARS-CoV在室溫下至少能夠生存2d，在有腹瀉病人的糞便中至少能夠生存4d，SARS-CoV的一個(gè)顯著特點(diǎn)是怕熱不怕冷，0°C和 4°C 至少生存4d，甚至多達(dá)21d 。在 37°C 條件下 ，SARS-CoV存活不到4d ， 在56°C時(shí) ， 病毒 的生存時(shí)間不超過(guò)30min 。這些結(jié)果表明 SARS-CoV的生存能力比人們想象的要頑強(qiáng)得多〔8〕。

此外 ，還有人觀察了小湯山醫(yī)院 (2003年北京SARS定點(diǎn)醫(yī)院)空氣中 SARS-CoV的污染情況，他們對(duì)小湯山醫(yī)院每天采集19個(gè)空氣樣品，4d共采集76個(gè)空氣樣品。最終在病房、內(nèi)走廊、護(hù)士站和病房排氣口下風(fēng)向5m處4個(gè)地點(diǎn)均有 SARS-CoV核酸檢出，其中以病房排氣口下風(fēng)向 5m處的陽(yáng)性率最高(58.3%)，病房(52.1%)和內(nèi)走廊(50.0%)的陽(yáng)性率相當(dāng) ，護(hù)士站相對(duì)較低 (25.0% )。但在病房外面的空氣中沒(méi)有檢測(cè)到活的 SARS-CoV〔9〕。

為了觀察SARS-CoV在污水、尿液、糞便中的存活情況。有人從小湯山醫(yī)院取患者的糞便和尿樣，污水取自解放軍309醫(yī)院 (SARS患者收治醫(yī)院 )和生活小區(qū)的生活污水。采用SARS-CoV加標(biāo)實(shí)驗(yàn)方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加標(biāo)的SARS-CoV的存活情況隨溫度而異，20°C避光條件下在醫(yī)院污水、生活污水和脫氯自來(lái)水中只能存活 2d，在糞便中可以存活 3d，在生理鹽水中可以存活14d，在尿液中可以存活17d；4°C情況下 ，SARS-CoV 在上述各種水體中均可以存活14d以上，在糞尿中可以存活17d以上〔10〕。

香港也有學(xué)者研究了 SARS-CoV在光滑表面上不同溫度和相對(duì)濕度下的穩(wěn)定性。干燥的病毒在光滑的表面上，在 2~25°C和相對(duì)濕度為40% ~50%下，即典型的空調(diào)環(huán)境下，可以保持5d以上的生存能力。SARS-CoV在低溫低濕環(huán)境下，具有很好的穩(wěn)定性 ，可能促進(jìn)其在亞熱帶地區(qū) (如中國(guó))的社區(qū)傳播。但是，在更高的溫度和較高的相對(duì)濕度(例如38°C，相對(duì)濕度 >95%)下，病毒生存力迅速喪失(>3log10)。這也可以解釋為什么一些熱帶地區(qū)亞洲國(guó)家(例如馬來(lái)西亞、印尼或泰國(guó))高溫和相對(duì)濕度高的環(huán)境，可以阻止 SARS的社區(qū)暴發(fā)〔11〕。

中東呼吸綜合癥(MERS)是一種由新的β冠狀病毒 (MERS-CoV)株引起的急性病毒性呼吸道疾病，死亡率高。自2012年在沙特阿拉伯報(bào)道第1例患者以來(lái)，據(jù)報(bào)道發(fā)生了由醫(yī)院獲得性感染和醫(yī)院間傳播引起的大規(guī)模暴發(fā)。韓國(guó)報(bào)告的大多數(shù)患者在醫(yī)院環(huán)境中也受到感染。但未查閱到 MERS-CoV抵抗力研究數(shù)據(jù)。然而，回顧MERS疫情的韓國(guó)醫(yī)院的感染控制經(jīng)驗(yàn)以及國(guó)內(nèi)外感染預(yù)防和控制指南，基本與SARS防控相似。均要求全面的感染控制措施，包括接觸控制，手衛(wèi)生，個(gè)人防護(hù)設(shè)備，消毒和環(huán)境清潔〔12〕。

2020年1月27日，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病所，從武漢華南海鮮市場(chǎng)的585份環(huán)境樣本中，檢測(cè)到3份樣品含有新型冠狀病毒核酸，并成功在陽(yáng)性環(huán)境標(biāo)本中分離病毒，從電鏡觀察、PCR和深度測(cè)序結(jié)果均提示，成功從環(huán)境樣本中分離到新型冠狀病毒，進(jìn)一步證實(shí)在華南海鮮市場(chǎng)環(huán)境中存在著大量的新型冠狀病毒2019-nCoV。由此估計(jì) 2019-nCoV在冬季寒冷的環(huán)境下，具有很強(qiáng)的抵抗力，可以像 SARS-CoV一樣，冬季至少存活數(shù)天以上〔13〕。

從以上冠狀病毒在各種環(huán)境中的抵抗力數(shù)據(jù)分析 ，對(duì)病人生活的環(huán)境 、可能污染的物品 ，以及廢棄物、污水、排泄物等，進(jìn)行定時(shí)清潔與消毒處理，是非常必要的。

03常用消毒方法對(duì)冠狀病毒的滅活效果

冠狀病毒屬于有包膜的親脂類病毒。按照人類認(rèn)知的所有微生物對(duì)消毒處理的抗力大小，有包膜的病毒屬于最容易殺滅的微生物。所有批準(zhǔn)上市的消毒劑 、消毒器械 、物理消毒方法 ，都能夠有效殺滅冠狀病毒。下面的研究，進(jìn)一步證明了這個(gè)結(jié)論。

3.1 物理消毒法

2003年，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院P3實(shí)驗(yàn)室，將 SARS病毒培養(yǎng)的上清液 (106TCID50)分裝到10mL離心管中，然后分別放入56°C和 70°C水浴中，間隔一定時(shí)間以后，取樣 0.5mL，接種VERO-E6細(xì)胞，觀察感染性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，56°C 加熱30min、70°C加熱 15min后 ，SARS-CoV細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè) ，均不能檢出有活病毒〔14〕。

同樣的結(jié)果，也被中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病所的研究證實(shí)，他們的工作發(fā)現(xiàn)，病毒懸液在56 °C以上作用30min ， 或者紫外線照射60min ， 均可以完全滅活 SARS-CoV的活性〔15〕。

Ansaldi等人 ，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究了紫外線對(duì)SARS-CoV、甲型流感病毒與呼吸道合胞病毒的滅活效果。將試驗(yàn)用的病毒懸液，暴露于紫外線(40mW/平方厘米)下，分別作用 30s、1min、2min、5min、15min和30min，然后測(cè)定殘留的病毒滴度，并進(jìn)行核酸PCR定性測(cè)定 。結(jié)果發(fā)現(xiàn) ， 作用2min即可破壞病毒的核酸，使病毒失去全部活性〔16〕。

Stibich等人，報(bào)告了一種紫外線消毒器，對(duì)物體表面與懸液中的MERS-CoV、以及Ebola病毒、水泡性口炎病毒(VSV)等致病性病毒，作用5min，即可具有良好的殺滅效果〔17〕。

Pratelli報(bào)告 ，犬冠狀病毒 (CCoV)的感染性 ，在56 °C情況下最多可保持30min ， 但在 65°C和75°C時(shí)往往迅速下降 。同時(shí) ，作者認(rèn)為 ，CCoV滅活方法可以用作動(dòng)物模型來(lái)研究人類冠狀病毒感染，從而降低研究人員在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室程序中意外接觸病原體的風(fēng)險(xiǎn)〔18〕。

3.2 化學(xué)消毒法

Ansaldi等人，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究了常用消毒劑對(duì)SARS-CoV、甲型流感病毒與呼吸道合胞病毒的滅活效果 ，同時(shí)測(cè)定殘留的病毒滴度與核酸(PCR)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.035%過(guò)氧乙酸、70%乙醇和0.05%次氯酸鈉，作用2min，即可滅活3種病毒的感染活性，但是核酸的完全破壞 ，需要延長(zhǎng)時(shí)間至30min。

0.1%次氯酸鈉與 2%濃度 2-苯甲基氯酚具有更強(qiáng)的消毒作用，不足2min，就能完全滅活病毒復(fù)制，并破壞病毒基因組。特別是 0.1%次氯酸鈉顯示出更快速的作用，作用1min，SARS-CoV、流感病毒、RSV均無(wú)法復(fù)制 ，基因組完全破壞。該結(jié)果通過(guò)電子顯微鏡觀察得到進(jìn)一步確認(rèn)，其病毒結(jié)構(gòu)似乎完全被破壞。

1%葡萄糖酸氯己定和 1%苯扎氯銨，同樣具有良好的殺病毒活性，接觸作用 1min，就抑制了 RSV復(fù)制。1%的苯扎氯銨作用 5min，可以滅活 SARS-CoV的復(fù)制活性 。1% 葡萄糖酸氯己定在所有測(cè)試時(shí)間，均可滅活SARS-CoV的復(fù)制活性。但是，這2種消毒劑對(duì)試驗(yàn)中的3種病毒，作用時(shí)間延長(zhǎng)到 30min，仍可檢測(cè)到RNA陽(yáng)性〔16〕。

國(guó)內(nèi)有人依據(jù)2002年版 《消毒技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定的病毒滅活試驗(yàn)方法，有人研究了一種含有170~1900mg/L醋酸氯己定的復(fù)方消毒乳液，對(duì)SARS-CoV的滅活效果，敏感細(xì)胞系為 Vero-E6細(xì)胞系 ，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該消毒液作用1min、2min、3 min，均能夠滅活5Log滴度以上的測(cè)試病毒〔19〕。

王新為等人，研究了醫(yī)院污水的消毒效果，使用的消毒劑是次氯酸鈉和二氧化氯。采用 SARS冠狀病毒加標(biāo)方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SARS冠狀病毒在污水中對(duì)消毒劑的抵抗力比大腸桿菌及f2噬菌體都低，在相同加氯量或余氯量情況下，氯制劑對(duì) SARS冠狀病毒的滅活效果優(yōu)于二氧化氯。當(dāng)污水中游離余氯量保持在0.5mg/L(氯制劑)或 2.19mg/L(二氧化氯)以上時(shí)可以保證完全滅活污水中的 SARS冠狀病毒，但對(duì)大腸桿菌和 f2噬菌體則不能完全滅活〔10〕。

Pratelli報(bào)告 ，犬冠狀病毒 (CCoV)的感染性 ，在pH值為6.0~6.5時(shí)更穩(wěn)定，而極端酸性條件使病毒滅活。兩種測(cè)試的醛類消毒劑能完全滅活病毒，但它們的作用取決于溫度和時(shí)間〔18〕。

Hulkower等人 ，利用2株冠狀病毒的替代病毒 ，鼠肝炎病毒 (MHV)和傳染性胃腸炎病毒 (TGEV)，使用定量載體(不銹鋼表面)方法，測(cè)試了幾種醫(yī)院常用化學(xué)消毒劑(一種酚類消毒劑鄰苯基苯酚/對(duì)叔戊基苯酚 、70%乙醇 、1∶100次氯酸鈉 、鄰苯二甲醛、含62生手消毒劑)的滅活效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，作用 1min后，TGEV的對(duì)數(shù)減少值為:70%乙醇 3.2，酚類2.0，鄰苯二甲醛 2.3，1:10次氯酸鈉 0.35，含 62%乙醇的快速手消毒劑 4.0、含 71%乙醇的衛(wèi)生手消毒劑3.5。MHV的對(duì)數(shù)減少值為:70%乙醇 3.9，酚類1.3，鄰苯二甲醛 1.7，1∶10次氯酸鈉0.62，含62%乙醇的快速手消毒劑 2.7、含 71%乙醇的衛(wèi)生手消毒劑 2.0。這個(gè)結(jié)果，提示乙醇具有非常快速的殺滅 SARS-CoV的作用〔20〕。

針對(duì) MERS-CoV的化學(xué)消毒，我國(guó)惠州市中心人民醫(yī)院，在收治MERS病人時(shí)，對(duì)醫(yī)院病人接觸的物品與環(huán)境 ，采用500~1000mg/L有效氯噴霧 、擦拭消毒嚴(yán)重污物的表面，250~50mg/L有效氯消毒潛在污染區(qū)，10~250mg/L有效氯消毒清潔區(qū)表面。對(duì)不耐腐蝕的物體表面采用75%(V/V)乙醇消毒劑噴灑至表面濕潤(rùn)，或用75%(V/V)乙醇與一次性醫(yī)用消毒濕巾擦拭，消毒作用至表面干燥。整個(gè)治療過(guò)程中，醫(yī)護(hù)人員零感染，病人痊愈出院〔21〕。

04冠狀病毒的消毒指南

通過(guò)對(duì) SARS、MERS疫情期間各國(guó)推出的各種消毒指南分析，發(fā)現(xiàn)了其根本的原則性一條，即各國(guó)批準(zhǔn)上市的家用或醫(yī)用消毒劑、消毒器械，均能夠有效殺滅新型冠狀病毒，具體消毒方法應(yīng)按照產(chǎn)品說(shuō)明書正確使用。

美國(guó)CDC快速推出了中文版 2019-nCoV防控指南，除了隔離、測(cè)體溫、帶口罩、手衛(wèi)生等措施外，對(duì)病人高頻接觸的物體表面、衣物等，推薦使用稀釋的漂白液(即 5%次氯酸鈉)或標(biāo)簽標(biāo)有“EPA-批準(zhǔn)”的家用消毒劑。衣物，還可以采用衣物標(biāo)簽上推薦的最高溫度來(lái)洗滌和干燥衣物。在家中配制漂白液時(shí)，應(yīng)將1湯匙(15mL)漂白劑加入到 1夸脫(946mL)水中。如需更多漂白液，可將 1/4杯(約 60mL)漂白劑加入到 1加侖(約 3785mL)水中。這樣大約稀釋 64倍，有效氯含量大約為781mg/L〔2〕。

針對(duì)SARS疫情防控，美國(guó)CDC的指南中，除了隔離 、PPE防護(hù)外 ，對(duì)消毒的說(shuō)明 ，仍然是使用任何EPA注冊(cè)的醫(yī)院清潔劑消毒劑，請(qǐng)遵循制造商關(guān)于使用稀釋(即濃度)，接觸時(shí)間和處理時(shí)間的建議〔23〕。

針對(duì)MERS疫情防控，韓國(guó)政府推出的指南中，對(duì)消毒方面有2個(gè)方面的說(shuō)明，一是對(duì)醫(yī)院使用的醫(yī)療器械與設(shè)備，應(yīng)遵循Spording的分類原則，選擇高中低水平的消毒;二是對(duì)清潔和環(huán)境消毒，應(yīng)選擇次氯酸鈉、酒精、酚類化合物、季銨化合物和過(guò)氧化合物適合用作環(huán)境的消毒劑。使用環(huán)境消毒劑時(shí)，應(yīng)認(rèn)真遵守稀釋比例，接觸時(shí)間和制造商規(guī)定的警告〔24〕。

針對(duì)今年暴發(fā)的新型冠狀病毒性肺炎疫情，WHO也發(fā)布了疑似感染者的防控指南。其中對(duì)消毒方面，只提及了次氯酸鈉消毒液。要求每天使用含有稀釋的漂白劑溶液(1份漂白劑兌9份水，有效氯含氯為500mg/L)的常規(guī)家用消毒劑清潔和消毒經(jīng)常接觸的表面，如床頭柜、床架和其他臥室家具。每天至少用含有稀釋的漂白劑溶液(1份漂白劑兌9份水)的常規(guī)家用消毒劑清潔和消毒浴室和衛(wèi)生間表面 1次。使用常規(guī)洗衣皂和水清洗或用普通家用洗滌劑水溫 60~90°C下機(jī)洗病人的衣服、被褥、浴室和手巾等，并徹底干燥〔25〕。

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